一、细胞株专利寄存要求：

①保藏中心接收专利寄存的细胞应处于冻存状态，无污染，存活率在80%以上，应确保冻存细胞到达保藏中心时，冻存细胞还处于干冰保护中；

②保藏中心建议下列步骤冻存细胞：细胞培养使用无双抗培养基，或至少在冻存前1天更换培养基为无双抗培养基；在培养细胞处于对数生长期时冻存细胞，贴壁细胞常规消化成单个细胞，加完全培养基离心，悬浮细胞直接离心1000rpm X 10min,去上清，沉淀用冻存剂悬浮。（冻存剂选用全血清＋5-10%DMSO或完全培养基＋5-10%DMSO　），对细胞计数，细胞浓度在1-5 X106 ，1ML分装1.8ML小管内，小管壁上预先写上细胞名称，细胞编号（由保藏中心提供）。

③有条件的单位建议冻存细胞使用程控降温仪冻存细胞，将步骤②制备的细胞放入程控降温仪内，4℃（30min）（可由4℃冰箱内完成）→-1℃/min→-30℃→-5℃/min→-90℃→直接将细胞放入液氮中。在条件受限时冻存细胞可将4℃放置30min的细胞冻存管放入带有棉花的泡沫盒后全密封，直接－70℃冰箱24hr →直接将细胞放入液氮中。也可作用带有异丙醇冻存盒，将冻存管放入盒内，直接－70℃冰箱24hr →直接将细胞放入液氮中。

④细胞活性和污染检测,细胞放入液氮罐1天后，取出冻存管，37℃水浴快速解冻，放入无双抗的完全培养基中，正常培养，并计数，细胞应无污染并可正常繁殖培养。

⑤寄存人应用干冰寄送冻存细胞至保藏中心。干冰的加量以到达保藏中心还有干冰存在为最低要求，按目前快递物流状态，通常应加5公斤干冰，夏天增加1-2公斤为佳。如果随身携带，请提前与保藏中心工作人员联系，以便顺利交接。